La relación núcleo-citoplasmática en la diferenciación y transformación celular del epitelio mamario / The nucleo-cytoplasmic relationship in the differentiation and cellular transformation of the mammary epithelium

ANTECEDENTES: Las células pertenecientes a la línea HC11 son estimuladas tanto a proliferar mediante el Factor de Crecimiento Epidérmico, como a diferenciar estimuladas con dexametasona, insulina y prolactina, dando origen a los tipos celulares HC11 GM y HC11 IM, respectivamente. De igual manera cuando ellas son transfectadas con el oncogén ras generan Q6 GM y Q6 IM, células transformadas. Producto de ambos mecanismos estas células asumen distintas propiedades modificando tanto sus componentes como sus funciones, los cuales pueden ser cuantificados mediante técnicas morfométricas. OBJETIVO: Evidenciar en términos cuantitativos y morfológicos las variaciones experimentadas tanto por los núcleos como los citoplasmas y su correspondiente relación núcleo-citoplasmática (N/C) pertenecientes a células mamarias de la línea HC11 con el decorrer de los mecanismos de diferenciación y de transformación celular. MÉTODO: Se estudió a nivel de microscopia electrónica de transmisión los tipos celulares en proceso de diferenciación y transformación, cuantificando variaciones de la relación núcleo-citoplasmática y su respectiva funcionalidad. RESULTADOS: Se evidencian diferencias estadísticamente significativas referentes a las áreas nucleares y citoplasmáticas pertenecientes a estos tipos celulares. CONCLUSIÓN: Las células del epitelio mamario en proceso de diferenciación como de transformación, presentan diferentes valores en su relación N/C hecho que responde a funcionalidades específicas en cada tipo celular.

BACKGROUND: Cells of the HC11 line are stimulated to proliferate using the Epidermic Growth Factor, and to differentiate with dexamethasone, insulin and prolactin, giving rise to cell types HC11 GM and HC11 IM, respectively. Likewise when they are transfected with the ras oncogen they generate Q6 GM and Q6 IM transformed cells. As a result of these two mechanisms, these cells assume different properties, in which both their components and their functions are modified. The modifications can be quantified by morphometric techniques. OBJECTIVE: To show in quantitative and morphological terms the variations effected in both the nuclei and the cytoplasms, and the corresponding nuclear-cytoplasmic ratio of mammary cells of the HC11 line, under the effects of cellular differentiation and transformation mechanisms. METHOD: The cell types undergoing differentiation and transformation processes were studied by transmission electron microscope, permitting quantification of variations in the nuclear-cytoplasmic ratio and its relation with the respective functions. RESULTS: Statistically significant differences were found in the nuclear and cytoplasmic areas of these cell types. CONCLUSION: cells of the mammary epithelium undergoing differentiation and transformation processes present different values for their nuclear-cytoplasmic ratio, and this responds specific functions in each cell-type.

Variaciones nucleolares en la transformación celular del epitelio mamario / Nucleolar variations in the cell transformation of mammary epithelium

Antecedentes: En la medida que las células pertenecientes a la línea HC11 son transfectadas con el onco-gén ras, asumen distintas propiedades resultando en tipos celulares transformados, modificando tanto sus componentes como sus funciones celulares, los cuales pueden ser cuantificadas mediante técnicas morfométricas. Objetivo: Evidenciar en términos cuantitativos y morfológicos las variaciones experimentadas por los nucleolos pertenecientes a células mamarias de la línea HC11 con el decorrer del mecanismo de transformación celular. Método: Se estudió a nivel de la microscopia electrónica de transmisión los tipos celulares en proceso de transformación (Q6 GM), en comparación con células francamente neoplásicas (Q6 IM), cuantificando variaciones de los nucleolos y su relación con estructuras involucradas en síntesis proteica. Resultados: Se evidencian diferencias estadísticamente significativas en el área, volumen y longitud entre los nucleolos pertenecientes a estos tipos celulares. Conclusión: Las células del epitelio mamario en proceso neoplásico presentan un notable aumento de sus nucleolos y sus ribonucleoproteínas, constituyentes que generarán básicamente ribosomas libres, que sintetizarán proteínas para ser utilizadas en el decorrer de las mitosis sucesivas y desreguladas.

Background: As cells belonging to the HC11 line become transfected with the ras oncogene, they assume different properties resulting in transformed cell types, with modified cell components and functions. These may be quantified by morphometric techniques. Objective: To provide quantitative and morphological evidence of the variations occurring in the nucleoles of HC11 line mammary cells as the cell transformation mechanism takes its course. Method: Transmission electron microscopy was used to study cell types in the transformation phase (Q6 GM) as compared with frankly neoplastic cells (Q6 IM), quantifying the variations between the nucleoles and their relation to structures involved in protein synthesis. Results: Statistically significant differences were found between the nucleoles belonging to these cell types with respect to area, volume and length. Conclusion: The nucleoles of mammary epithelial cells in the process of neoplasia, present a notable increase, and their constituent ribonucleoproteins will basically generate free ribosomes, synthesising proteins available for use in successive, unregulated mitosis.

Morfometría del nucleolo en la diferenciación celular del epitelio mamario / Nucleolus morphometry in the cellular differentiation of mammary epithelium

Antecedentes: El proceso biológico de diferenciación celular es la traducción de múltiples procesos nucleares y citoplasmáticos que determinan cambios complejos y fundamentales en la ultraestructura, bioquímica y fsiología celular, los cuales pueden ser cuantifcados mediante técnicas morfométricas. Objetivo: Evidenciar en términos cuantitativos y morfológicos las variaciones experimentadas por los nucleolos pertenecientes a células mamarias de la línea HC11 tanto normales como en mecanismo de diferenciación. Método: Se estudió a nivel de la microscopía electrónica de transmisión los tipos celulares en etapa de proliferación (HC11 GM) en comparación con células en estadio de diferenciación (HC11 IM), cuantifcando las variaciones de los nucleolos y su relación con estructuras involucradas en síntesis proteica. Resultados: Se evidencian diferencias estadísticamente signifcativas referentes al área, volumen y longitud entre los nucleolos pertenecientes al tipo celular normal-proliferante y el que se encuentra en proceso de diferenciación. Conclusión: Las células mamarias en proceso de diferenciación presentan una notable disminución de sus nucleolos, y sus ribonucleoproteínas constitutivas generarán básicamente ribosomas adheridos al retículo endoplasmático rugoso, sintetizando proteínas de exportación.

Background: The biological process of cell differentiation is the traslation of multiple nuclear and cytoplas-mic processes that determine complex and fundamental changes in ultrastructure, biochemistry and cell physiology, which can be quantifed using morphometric techniques. Objective: To show in quantitative and morphological terms changes experienced by the nucleolus belonging to HC11 line mammary cells both, in proliferating and differentiation process. Methods: A study at the level of transmission electron microscopy of cell types in stage of cell proliferation in comparison with stage of differentiation was designed to quantify variations of nucleolus and their relation to structures involved in protein synthesis. Results: Marked differences in the area, volume and length of the nucleolus were found between normal-proliferating cell types and those in mechanism of differentiation. Conclusion: The mammary cells in differentiation process show a dramatic decline in its nucleoli and their ribonucleoproteins generate basically ribosomes attached at endo-plasmic reticulum, synthesizing export proteins.

Efecto del láser AsGa sobre la antomía normal de la articulación témporo mandibular (ATM) de conejos / Laser AsGa effect on the normal anatomy of the temporo mandibular joint (TMJ) on the rabbit

El láser blando o infrarrojo es utilizado en clínica veterinaria por sus efectos analgésicos, antiinflamatorios, bioestimulantes y curativos, a fin de tratar lesiones y mejorar el proceso de cicatrización. El presente estudio tiene como propósito evaluar el efecto del láser infrarrojo AsGa (10miliwatt, 780 nanómetros, 2joule/cm²) sobre la articulación témporo mandibular (ATM) de conejo, para determinar las alteraciones que produce este tipo de irradiación sobre los tejidos normales. Se utilizaron 10 conejos de un peso promedio de 2.5 Kg., criados bajo las mismas condiciones de habitat y alimentación, a los cuales se les irradió la ATM derecha. Como control se usó la ATM izquierda del mismo animal. Los especimenes fueron eutanasiados y sus ATM disecadas midiéndose con calibrador digital los diámetros del disco articular, cóndilo mandibular y fosa mandibular. Al mismo tiempo, se tomaron muestras para realizar un análisis histológico de estas mismas estructuras articulares. Macroscópicamente se determinaron significativos cambios dimensionales en la anatomía las estructuras irradiadas, en comparación con los controles, especialmente el novel de disco y fosa mandibular. A nivel de microscopia óptica se observaron variaciones en la disposición del colágeno, como también, alteraciones en el ordenamiento de los estratos celulares tanto en el disco articular, como en la superficie del cóndilo mandibular. Se concluye que el láser blando produce variaciones y microscópicas en la ATM de conejo.

Soft or infrared laser is widely used by their analgesic, anti-inflammatory, biostimulant and curative effects, specially on veterinary clinical procedures destined to treat injury and to improve scarring process. The actual study has the object to detect the AsGa IR laser effects (10miliwatt, 780 nanómero, 2 joule /cm2) on natural rabbit Temporal Mandibular Joint (TMJ) tissue. Ten rabbit specimens from 2.5 Kg average weight reared and nurtured under the same conditions were used as the experimentation subjects in this study. Laser irradiation was performed at the right TMJ of each specimen only, while the other side was left as a control. After each specimen sacrifice their respectives TMJ were removed and dissected having cared to measure on the articular disk, mandibular condyle and mandibular fossa samples their respective diameters employing a digital calibrator. At the same time several samples were taken from the articular structures to perform a hystologycal analysis. Important changes in size and dimension were found on the anatomy of the irradiated structures specially at the level of both mandibular disc and fossa. Instead by optical microscopy were detected several variations on the collagen disposition as also some alterations on the cell layer distribution at the level of the articular disk and mandibular condyle surface. Finally,it can be concluded the soft laser induced macro and microscopic morphological alterations on natural rabbit TMJ tissue.

Análisis morfométrico de lisosomas: marcadores de transformación celular del epitelio mamario / Morphometric analysis of lysosomes: markers of cellular transformation of the mammary epithelium

ANTECEDENTES: Transformación celular es el mecanismo resultante de la potente acción generada por onco-genes transformantes sobre una célula normal, los cuales con la consiguiente expresión de oncoproteínas determinan drásticos cambios tanto en la morfología como en los volúmenes de los componentes celulares, generando una célula con diferente funcionalidad. OBJETIVO: Precisar las modificaciones que caracterizan al mecanismo transformante en células de epitelio mamario transfectado con el oncogén ras (HC1 Iras) en comparación con su tipo celular normal (HC11GM). MÉTODO: Se estudió con microscopía electrónica de transmisión aplicando técnicas morfométricas a estos tipos celulares con énfasis en los lisosomas, cuantificando variaciones del organelo responsable de la digestión celular. RESULTADOS: Todos los parámetros lisosomales evaluados en el tipo celular transformado presentan diferencias significativas con respecto a la célula normal. CONCLUSIÓN: Las drásticas modificaciones experimentadas por los lisosomas se reflejan en la adquisición de nuevas funcionalidades en la célula transformada.

BACKGROUND: Cellular transformation is the result mechanism of powerful action generated by transforming oncogene over a normal cell, which with the subsequent oncoprotein expression leads to drastic changes in morphology as well as in cell components volumes, generating a cell with a different function. OBJECTIVE: To specify the modifications that characterizes the transforming mechanism in mammary epithelial cells transfected with the ras oncogene comparing them with its normal cell type. METHOD: Transmission electronic microscopy using morphometric techniques was applied to this cell types, emphasizing lysosomes variations, trying to clarify its role in each cell type metabolism. RESULTS: Everyone lysosomal parameters examined in transformed cell type present significant differences regarding to the normal cells. CONCLUSION: The drastic changes in lysosomes reflected in the acquisition of new energy requirements and metabolism in the transformed cell.

Las mitocondrias en la transformación celular del epitelio mamario / The mitochondria in the mammary epithelial cells transformation

Antecedentes: La adquisición del fenotipo metastático es el resultado de la potente acción generada por oncogenes transformantes sobre una célula normal los cuales con la consiguiente expresión de oncoproteínas determinan drásticos cambios tanto en la morfología como en los volúmenes de los componentes celulares, generando una célula con diferente funcionalidad. Este mecanismo corresponde a la transformación celular. Objetivo: Precisar las modificaciones que caracterizan al mecanismo transformante en células de epitelio mamario transfectado con el oncogén ras (HC11 ras) en comparación con su tipo celular normal (HC11GM). Método: Se estudió con microscopia electrónica de transmisión aplicando técnicas morfométricas a estos tipos celulares con énfasis en las mitocondrias, cuantificando variaciones del organelo generador de energía. Resultados: Todos los parámetros mitocondriales evaluados en el tipo celular transformado presentan diferencias significativas con respecto a la célula normal. Conclusión: Las drásticas modificaciones experimentadas por las mitocondrias se reflejan en la adquisición de nuevos requerimientos energéticos y metabólicos en la célula transformada.

Background: The acquisition of the metastatic phenotype is the result of the transforming oncogene powerful action over a normal cell which with the subsequent oncoprotein expression leads to drastic changes in morphology as well as in cell components volumes, generating a cell with a different function. This mechanism relates to the cell transformation. Objective: To specify the modifications that characterize the transforming mechanism in mammary epithelial cells transfected with the ras oncogene comparing them with its normal cell type. Method: Transmission electronic microscopy using morphometric techniques was applied to this cell types, emphasizing mitochondria variations, trying to clarify its role in each cell type metabolism. Results: Everyone mitochondrial parameters examined in transformed cell type present significant differences regarding to the normal cells. Conclusión: The drastic changes in mitochondria are reflected in the acquisition of new energy requirements and metabolism in the transformed cell.

Variaciones mitocondriales en el transcurso de la diferenciación celular del epitelio mamario / Mitochondrial variations during the cellular differentiation in the mammary epithelium

El proceso de diferenciación representa un complejo mecanismo mediante el cual las células, variando notablemente su morfología, adquieren una forma determinada, tamaño específico, cierta polaridad y constancia de constituyentes celulares, producto de la activación génica que permiten que dicha célula diferenciada cumpla con una función en forma óptima. Estas modificaciones pueden ser precisadas utilizando técnicas morfométricas que dan cuenta de las variaciones que caracterizan el mecanismo. Células normales de epitelio mamario de rata en cultivo, estimuladas a proliferar con el factor de crecimiento epidérmico (EGF) origina la célula HC11 GM. Ellas son inducidas a diferenciarse con inducciones hormonales de dexametasona, insulina y prolactina, generándose la célula HC11 IM. Se estudió con microscopía electrónica de transmisión estos tipos celulares con énfasis en las mitocondrias, determinando variaciones del organelo generador de energía, en lo relacionado a variables tanto cuantitativas como morfológicas, precisando así su rol en la actividad metabólica de cada tipo celular.

Apoptosis en células mamarias transfectadas con el oncogen ras / Apoptosis in mammary epithelium transfected with ras oncogen

La muerte celular programada o apoptosis, es un proceso activo que involucra gasto energético y control génico desencadenado tanto por agentes internos como producto de señales externas a la célula, las cuales inducen a desviar el transcurso normal de desarrollo mediante la ejecución de un nuevo programa genético optando por el suicidio celular. Células normales de epitelio mamario de ratas HC11 GM en proceso de proliferación fueron transfectadas con el oncogen ras generando el tipo celular transformado Qey produciendo múltiples modificaciones cuanti y cualitativas de sus componentes celulares. Esta transformación generada por el ras determina finalmente la aparición de un fenotipo neoplásico, sin embargo, algunas células, producto de estas profundas modificaciones provenientes del oncogen, derivan al proceso apoptótico las cuales son evidenciadas y caracterizadas en este trabajo con ayuda de la microscopía óptica.

The programmed cellular death, is an active process that involves energy and genie control, triggered so much by internal agents as well as by external cell signals which induce to turn aside the normal course of development by means of the execution of a new genetic program and entering the cellular suicide. Normal HC11GM cells of mammary ephitelium of rats in proliferation process were transfected with ras oncogen generating the cellular Q.6 transformed type and producing multiple qualitative and cuantitative modifications of their cellular components. This transformation generated by ras, finally determines the appearance of a neoplasic phenotype, nevertheless, some cells produced by these deep modifications from the oncogen, enter the apoptotic process which are demonstrated and characterized in this work with the help of optical microscopy.

Drástica disminución de Beta 1 integrina caracteriza la transformación celular del epitelio mamario / Beta 1 integrin decrease determine the cellular transformation of mammary epithelium

El proceso biológico de transformación es el resultado de numerosos y complejos mecanismos traducidos en cambios sustanciales que involucran tanto a la ultraestructura, como a la bioquímica y fisiología celular, los cuales pueden ser visualizados mediante la utilización de técnicas morfométricas que expresan la correspondiente información cuantitativa. Células en cultivo de epitelio mamario de rata tanto normales, estimuladas a proliferar con el factor de crecimiento epidérmico (EGF), como transformadas, producto de la transfección con el oncogén ras, originan el grupo celular HC11 y HC11 ras, respectivamente. Se estudió a nivel de microscopía electrónica de transmisión en los tipos celulares descritos, precisando datos morfométricos concomitantes al decorrer de la transformación, evaluando específicamente las fracciones volumétricas de Beta 1 integrina, glicoproteínas receptoras presentes en la superficie celular involucradas en la adhesión tanto a componentes de la matriz extra-celular (MEC) como a la interacción célula-célula. La diferente expresión de estas moléculas determinará en los tipos celulares descritos, distintas características fisiológicas inherentes al mecanismo de transformación.

Las células mamarias en proceso de diferenciación disminuyen su volumen citoplasmático y nuclear / Mammalian cell differentiation process decreasing their cytoplasmatic and nuclear volume

Las modificaciones experimentadas en el proceso biológico de diferenciación celular determinan cambios complejos y fundamentales en la ultraestructura, la bioquímica y la fisiología celular que pueden ser apreciadas claramente utilizando técnicas morfométricas, las cuales traducidas en información cuantitativa permiten evidenciar los cambios que conlleva este mecanismo. Células normales de epitelio mamario de rata, mantenidas en cultivo, estimuladas a proliferar con el factor de crecimiento epidérmico, originan el grupo celular HC11 GM. Estas células normales y proliferantes son inducidas a diferenciarse mediante inducciones de hormonas lactogénicas: dexametasona, prolactina e insulina, determinándose la generación de un tipo celular diferenciado: HC11 IM. Estudiamos a nivel de microscopía electrónica estos tipos celulares, procurando datos morfométricos discriminantes a lo largo de la diferenciación, diagnosticando las fracciones volumétricas de componentes celulares, determinando así mismo la variación en el área de las células involucradas, precisando de este modo, nuevos marcadores en el padrón de modificación que caracteriza este proceso.

Analisis morfométrico y ultraestructural de componentes asociados a síntesis proteica en células mamarias normales y transformadas / Morphometric and ultrastructural analysis of components associated to protein synthesis in normal and transformed mammary cells

Las células mantenidas en cultivo que conservan sus características propias, constituyen un excelente modelo para el estudio de las modificaciones fisiológicas, morfológicas y morfométricas que caracterizan el proceso biológico de la transformación celular. La línea HC11 corresponde a células de epitelio mamario de rata, normales, mantenidas en cultivo, las cuales estimuladas a proliferar con factor de crecimiento epidérmico originan el grupo celular HC11 GM. Cuando estas células normales y proliferantes son transfectadas con el oncogen ras, se determina la generación de un tipo celular transformado, el cual por efecto de las sucesivas mitosis deriva en el grupo celular HC11ras.

Cambios fenotípicos del epitelio mamario inducidos por su entorno celular / Phenotypical changes of mammary epithelium induce by its celullar surroundings

Se presenta una revisión bibliográfica relacionada con la funcionalidad de la matriz extracelular y sus distintos componentes en el sentido de gatillar y modular el proceso biológico de la diferenciación celular, con especial énfasis en los diferentes fenotipos adquiridos por las células pertenecientes al epitelio mamario de ratas mantenido en cultivo, como resultado de la inducción al proceso de diferenciación tanto en ausencia como en presencia de constituyentes de dicha matriz.

Diferenciación celular del epitelio mamario en cultivo / Cellular differentiation of the mammary epitelium in culture

The functional differentiation of mammary epithelial cells requires specific hormones, growth factors and chemical signals of the cellular environment. These signals consist in cell communication with the extracellular matirx and cell-cell interactions whic though an intrincated mechanism lead to the events that trigger milk secretion. The mammary epithelial cells HC!! from the cellular line COMMA-1D were cultured in the presence of lactogenic hormones such as insuline, dexametazone and prolactin and further stimulated with the epidermal growth factor. In these conditions the cell differentiated, presenting quantitative changes in shape and volume on their organelle cell structure. These cells synthesize betha casein and the intermediary filaments of keratin demonstrated by immunoblotting as well as electronic micrographies

Expresión de integrinas en células mamarias normales y transformadas / Integrin expression in normal and transformed mammary cells

La familia de las integrinas representa una clase de receptores que median la adhesión celular a un sustarto. Este estudio permite mostrar morfológicamente el patrón de expresión de ß1 integrinas en la membrana plasmática de células establecidas del epitelio mamario de ratas normales, como en aquellas transformadas con el oncogen ras. El análisis de las correspondientes micrografías electrónicas obtenidas luego de tratar los tipos celulares indicados con la técnica de inmuno-oro, muestra claramente la distribución y ubicación de estos receptores en la superficie celular y su relación con elementos filamentosos del citoesqueleto

Los oncogenes como generadores de la transformación celular / Oncogenes as generators of cell transformation

Esta revisión tiene por finalidad, presentar información actualizada de la estructura, función y localización de diferentes oncogenes en las células eucarióticas, resaltando la importancia de estos agentes como generadores de células neoplásicas formadoras de tumores

Polirribosilación de proteínas: un mecanismo modulador de funciones celulares / Protein poliribosilation: a modulated mechanism of cellular function

Se presenta una revisión sobre la función de la Poli (ADP-ribosa) sintetasa, enzima nuclear que sintetiza monómeros y polímeros a ADP-ribosas a partir de NAD+, mecanismo denominado polirribosilación. Estas moléculas sintetizadas son unidas covalentemente a proteínas, básicamente histonas, modificando, por ende su funcionalidad. Asímismo, se describen actividades enzimáticas que degradan ADP-ribosas. Se plantean también, los roles que el proceso de polirribosilación, podría modular en el núcleo eucariótico

Transporte de Neisseria gonorrhea por el espermatozoide humano através de moco cervical estrogénico: un estudio en vitro

Se presenta un estudio in vitro de la migración de Neisseria gonorrheae adherido al espermatozoide humano através del moco cervical estrogénico. Se describen los tipos de contactos que caracterizan esta adherencia celular, basado en la observación de las muestras con microscopía electónica. Esta interacción celular podría tambíen explicar la génesis de los procesos inflamatorios pelvianos de origen gonocícito, mediante el transporte activo del agente etiológico